注意事項：

1、注意無(wú)菌操作

2、細胞復蘇時(shí)融化凍存細胞速度要快，防止細胞損傷，細胞復蘇后的操作在適宜溫度中進(jìn)行，減少冷凍保護劑對細胞的毒性。

3、為了避免復蘇過(guò)程中細胞液中有冰晶的出現，破壞細胞膜及細胞內部結構。從液氮拿出來(lái)，要快速丟入37度水浴，等細胞液剛剛化完取出，加培養液稀釋。

4、細胞放入水浴中注意用鑷子夾住細胞凍存管并在水浴中不時(shí)晃動(dòng)，使其受熱均勻，并防止水浴時(shí)水進(jìn)入細胞凍存管污染細胞。打開(kāi)細胞凍存管之前要用酒精棉球將凍存管消毒并晾干。

5、液氮一定的危險性，打開(kāi)液氮罐取出細胞時(shí)，要注意防凍，戴防凍手套，防護眼睛。

6、如果凍存管密封不嚴，液氮可被吸入。由于解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，將可能發(fā)生爆炸。復蘇過(guò)程中應蓋上恒溫水浴鍋的蓋。

細胞復蘇后貼壁細胞較少的原因：

1、凍存細胞時(shí)消化時(shí)間過(guò)長(cháng)，導致細胞復蘇時(shí)失去鐵壁能力。

2、細胞凍存液的質(zhì)量不好也會(huì )導致細胞死亡。

3、凍存液的量加的太多也不好。

4、凍存的時(shí)候把DMSO混均勻，會(huì )有一些影響，但不會(huì )太大。